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DL50
Cosas a saber
DEFINICIÓN: dosis estadísticamente calculada que produce la muerte del 50% de una población bajo determinadas condiciones de laboratorio (ES UNA RESPUESTA CUANTAL)
Del grafico:
• Calculo masa de sust/masa de animal con su corresp. Intervalo de confianza
• No es una corriente biológica, pero se usa para clasificar y comparar toxicidad de agentes químicos
• No es sinónimo de toxicidad aguda
• 2 sustancias pueden tener = DL50 pero diferente pendiente y caract. Toxicológicas
• Curvas paralelas PUEDEN indicar mecanismo y cinética SIMILAR
• Para comparar potencia toxica las curvas DEBEN ser paralelas
• Si no son paralelas la de > pendiente es la mas peligrosa
DL50 depende de:
• Especie en estudio
• Vía de administración

Que camino sigo para evaluar toxicidad aguda?
Síntesis de molécula
↓
Ensayos físico-químicos (para detectar propiedades corrosivas, explosivas, etc.)
↓
Estudios de toxicidad AGUDA (de aquí obtengo el valor de DL50 x 2 métodos)
↓ ↓
Método tradicional Test preliminar
↓
Método up and Down
↓
Procesamiento de datos
↓
Calculo valor DL50


TOXICIDAD AGUDA
Objetivo de estudios de toxicidad aguda
• Definir toxicidad intrínseca de una sustancia
• Determinar el órgano blanco y mecanismo de acción
• Proveer información de riesgo
• Proveer información acerca de selección de dosis para estudios de toxicidad prolongada

Procedimiento experimental
Uso 3 dosis como mínimo
• ALTA (muerte 100%)
• MEDIA
• BAJA (muestre 0%)
Generalmente se usan 5 grupos x si alguno falla, para hacer una curva DR
Entre 5-10 animales x grupo de dosis + grupo control
La selección de dosis puede ser:
• X bibliografía
• X comparación de estructuras químicas
• X prueba piloto. Se toman 4 animales y se administran 100mg sust/kg, si mueren divido dosis por 4 (25 mg) y ensayo en otro grupo , si viven x4 (400 mg/kg). Luego observo síntomas y signos
Uso animales de ambos sexos
Administro x 2 vias, I.V y la que se usara en ser humano
Las determinaciones de las distintas toxicidades (inhal, dérmica, oral) se completan en el capitulo Aceptabilidad de una droga, pag 20 resumen
DETERMINACIÓN DEL DL50
Tenemos 2 métodos:
1. Método tradicional o de Litchfield and Wilcoxon
2. Método alternativo o Up and Down
Ver detalles en cuadro pag14
Método tradicional
• La idea es convertir la respuesta en unidades probit usando una tabla (grafico de RTA en unidades probit en Fc log dosis)
• Realiza un test de homogeneidad de datos
• Del grafico obtenido, se extrapola el valor de log dosis correspondiente a 50, entre 16 y 84% se calcula la pendiente
• Se debe realizar un calculo para obtener factor de corrección (f) y otro para determinar el I.C
Como se procesan los datos? (el paso a paso de lo visto antes, no creo que lo tomen)
1. Convertir RTA en papel probit
2. Convertir dosis en log
3. Realizar test estado de homogeneidad de datos , ejemplo Chi cuadrado
4. Graficar RTA en unidades probit en fc del log de dosis
5. De la línea de regresión, extrapolar el valor de log dosis 50, 16, 84
6. Calcular pendiente S= ½ ((DL84/DL50)+(DL50/DL16))
7. Calculo factor de corrección f=S2,77/raíz de N
8. Calculo limites de confianza para DL50. Limite sup DL50*f . Limite inf DL50/f.
El 0 y 100 se corrigen x tablas.
De esta manera obtengo el DL50 con su IC.

Método alternativo
En este realizo lo que se llama test limite o preliminar, la idea es arrancar dando una dosis bien alta, si los animales pasan la prueba no hay necesidad de realizar el estudio principal porque este se realiza con dosis mucho mas bajas. Luego paso a la parte ppal del ensayo (test definitivo). Este ensayo limite lo uso si no tengo ningún dato o si hay evidencias firmes de baja toxicidad.
Test limite:
Es secuencial, se usan como máximo 5 animales.
Empiezo con una dosis de 2000mg/Kg en 1 animal, si muere paso a hacer el test definitivo porque evidentemente necesito arrancar con dosis mas bajas. Si sobrevive a las 48 hs doy 2000mg/kg a otro animal, observo 48hs y asi con los otros animales. Cuando mueren 3 →DL50 <2000mg/Kg , paso a hacer el test alternativo propiamente dicho. Si 3 o mas animales sobreviven →DL50 >2000mg/Kg.
Test definitivo:
Es muy importante en esta parte la información bibliográfica, si tengo info de la dosis, uso una dosis ligeramente menor a la DL50 estimada, si no tengo info administro 175 mg/Kg y uso factor de progresión de 3,2; o sea doy la dosis, observo 48 hs, si no muere divido la dosis por 3,2 pero si vive la multiplico x 3,2 y así sucesivamente hasta el END POINT
END POINT
• 3 animales consecutivos viven con la DOSIS MÁXIMA
• 5 reversiones en una serie de 6 consecutivos
En la realidad se usa un software que le voy cargando los datos y me dice cuando se termina el ensayo, si no obtengo los resultados antes mencionados el equipo calcula LR1 y LR2 (LR es la relación likelihood), ambas relaciones deben ser ≥2,5 para finalizar el test.